凍融工藝在mRNA疫苗中應用

更新時間：2024-11-21 點擊次數：737次

信使RNA（mRNA）是一類新興(xing) 的生物治療藥物。雖然它們(men) 有相當大的前景，但這一領域仍處於(yu) 起步階段。mRNA治療為(wei) 挑戰性疾病的靶向治療和靈活生產(chan) 提供了新的機遇，抗C O V I D - 1 9的mRNA疫苗的快速發展就證明了這一點。

mRNA的臨(lin) 床潛力已經超出了疫苗的範疇，擴展到其他先進的治療方法，例如蛋白質替代、基因治療和癌症免疫治療。

由於(yu) mRNA是脆弱的，不穩定的，開發 mRNA 疫苗的最重要的挑戰仍然是其固有的不穩定性，因為(wei) 它很有可能在冰點以上分解。

mRNA 構建模塊的修飾以及能夠相對安全地包裹它顆粒的開發幫助了mRNA 疫苗候選者。但是這種新型疫苗仍然需要冷凍條件存儲(chu) 、運輸和管理。

WHO世界衛生組織在對mRNA在凍融方麵的建議：

在用脂質納米粒包封期間以及生產(chan) 條件下應特別注意盡量減少 mRNA 的降解，這個(ge) 包封和生產(chan) 添加會(hui) 影響脂質納米粒及最終 mRNA-LNP 疫苗產(chan) 品的穩定性，例如：產(chan) 生的影響條件包括mRNA解凍和LNPs或mRNA- LNPs的冷凍速率。

已上市的某mRNA產(chan) 品中在研發到生產(chan) 中的凍融應用

Assessment report---C O V I D - 1 9 Vaccine（根據某上市的mRNA疫苗的評估報告---EMA）

特征

申請人提供了mRNA活性物質的詳細特征，包括mRNA CX-024414結構特性的詳細信息。此外，還提供了色譜圖、熱變性和凍融降解及其對蛋白質表達的影響數據。

評：該公司提供了向監管機構提供了凍融降解的數據，以及凍融對蛋白表達的影響數據

最終產(chan) 品的成分

添加蔗糖是為(wei) 了通過冷凍/解凍和長期儲(chu) 存來提高產(chan) 品的穩定性。

評：該公司-采用蔗糖來提高凍融和存儲(chu) 穩定性

生產(chan) 工藝開發

載有 mRNA 的 LNP 中間體(ti)

該產(chan) 品由一種mRNA-脂質複合分散體(ti) 組成，其中包含編碼2019年XIN XING冠狀病毒（SARS-CoV-2）融合前穩定 Spike 蛋白的mRNA（CX-024414）。已提供全麵的開發數據。已經描述了在開發過程中所做的變更。它們(men) 包括放大、增加批量冷凍步驟、改變一些設備和修改脂質摩爾比以與(yu) 平台工藝匹配。

評：---在生產(chan) 工藝開發過程中增加了大體(ti) 積冷凍步驟。

產(chan) 品生產(chan) 和工藝控製---涵蓋了冷凍工藝

LNP 製造過程包括脂質儲(chu) 備溶液 (LSS) 製備、納米沉澱混合、切向流過濾 (TFF)、稀釋和冷凍保護劑添加、澄清、填充以及冷凍和儲(chu) 存。

評：---在生產(chan) 產(chan) 品過程中冷凍和存儲(chu) 是分開的。產(chan) 品經冷凍後存儲(chu) 。工藝步驟必須關(guan) 注批次間和批次內(nei) 的均一性，冷凍速率是關(guan) 鍵參數。

產(chan) 品的穩定性

載有 mRNA 的 LNP 中間體(ti)

使用開發批次進行了支持負載 mRNA 的 LNP 中間凍融循環的穩定性研究。結果表明，mRNA-1273 LNP 生物物理屬性（粒徑、多分散性、封裝）不受不同凍融過程（室溫或 2°C 至 8°C）或 5 個(ge) 凍融循環的影響，還進行了支持成品凍融循環的穩定性研究。凍融循環最多重複五次。所有結果都在規格範圍內(nei) ，表明最終產(chan) 品在重複凍融步驟方麵相對穩定，支持五個(ge) 凍融循環。然而，批準的產(chan) 品信息中不允許在上市時反複凍融小瓶。

評：--經優(you) 化的凍融工藝在規格範圍內(nei) ，該公司的公司對產(chan) 品的穩定性沒有影響

臨(lin) 床研究的設計和執行---仍需要評估凍融的穩定性，涵蓋運輸和存儲(chu)

RT-PCR 測定得到了可接受的驗證，並提供了額外的驗證研究，以評估臨(lin) 床樣品在各種溫度和冷凍/解凍循環中的穩定性，以涵蓋運輸和儲(chu) 存條件。

評：在臨(lin) 床解凍做的凍融穩定性實驗，涵蓋運輸和存儲(chu) ，為(wei) 後期上市做準備

該公司的凍融工藝條件是什麽(me) ?

該公司凍融工藝的開發過程中，和SUS做了緊密合作，SUS根據此公司的要求，開發相應的工藝配方。

1. 特殊要求的凍融曲線降低了對mRNA產(chan) 品的影響，影響主要來源於(yu) 以下三個(ge) 方麵：

目標必須是在凍結過程中減少壓力

壓力主要這幾方麵

• 冷凍濃縮

• 漂移

• 蛋白質與(yu) 冰表麵的相互作用