高壓滅菌鍋滅菌效果的驗證方法

1 試驗材料

嗜熱芽孢杆菌紙片；噬熱芽孢杆菌ATCC7053，含芽孢量5—105CFU片]121 oC壓力蒸汽滅菌化學指示卡；溴甲酚紫腖水培養(yang) 基，116~C20分鍾高壓滅菌後備用。0—150 oC留點溫度計

2 方法與(yu) 結果

將嗜熱芽孢杆菌紙片用無菌鑷子放人密封試管中。化學指示卡和留點溫度計放人敞口的試管中。上兩(liang) 種試管各準備5—10份。分別放置在高壓滅菌鍋蒸汽口處、底部排氣口處及底部水口處或上下左右中間5處。如滅菌器為(wei) 二層，則需放10處】。留點溫度計標化合格後可用於(yu) 驗證試驗。檢測前，需將溫度計的水銀柱甩至40℃以下。每次監測後留點溫度計的溫差應在1oC之間，則說明滅菌器內(nei) 的溫度分布是均勻的。滅菌後的菌片應在嚴(yan) 格無菌操作條件下放人滅菌後的溴甲酚紫腖水培養(yang) 基內(nei) 。56—60~C培養(yang) 2448小時，觀察顏色變化。如培養(yang) 基變為(wei) 黃色，說明菌片中的嗜熱芽孢杆菌尚未*滅活，細菌仍可在培養(yang) 基中生長，分解葡萄糖產(chan) 酸變為(wei) 黃色。如培養(yang) 基顏色不變化仍為(wei) 紫色，則說明芽孢菌已滅活。同時要用未經滅菌的紙片放人培養(yang) 基內(nei) 作為(wei) 陽性對照，不加紙片的空白培養(yang) 基作為(wei) 陰性對照。化學指示卡上的指示色塊，在高壓蒸汽滅菌時，由淡黃色變為(wei) 黑色。隨著顏色變化的深淺，並與(yu) 對照色相比，可判斷滅菌效果是否達到要求。化學指示卡應在幹燥處保存。遇潮會(hui) 變色，影響滅菌效果的觀測。高壓蒸汽滅菌必須使蒸汽順利進入滅菌器內(nei) ，與(yu) 滅菌物品接觸，並將原有的冷空氣排出方可達到滅菌的效果。要進行空載熱分布和滿載熱穿透力驗證(滿載時不超過總體(ti) 積的2／3)。二種驗證各重複三次，共做六次見表。5個(ge) 點六次試驗表明溫度均在121 oC，化學指示卡變黑；程度與(yu) 對照色一致；培養(yang) 基均未改變顏色，說明高壓蒸汽滅菌效果合格。