使用瓶子凍原液，這個過程中會出現什麽問題。

首先我們(men) 了解一下裝有原液的瓶子在哪裏凍？

1. 把瓶子放入極冷的液體裏麵，
2. 在超低溫冰箱裏麵存放
3. 在速凍箱裏麵存放

這三種情況的優(you) 缺點：

在種情況，凍的過程省時，但是極速冷凍的時候瓶子會(hui) 出現大量的冰晶，而不是大塊的冰。大量的小冰晶的出現使得溶液中蛋白和冰接觸的表麵積劇增。同時溶液中大量細微的空氣和蛋白混在一起，在融的過程中，影響蛋白的活性。

第二種情況，是很多客戶現在正在使用的方法。直接放在℃的冰箱中。

               如果放一個(ge) 5L的瓶子，（Thermo冰箱的現在4層，每層高度也隻能放5L）

               在超低溫裏麵10-12個(ge) 小時，如果多放幾個(ge) 所需時間成倍的增加。

              有數據 表明，冰箱內(nei) 放置24個(ge) 5L的瓶子，每個(ge) 瓶子放3.5L的液體(ti) 。設定溫度在-40℃，總共液體(ti) 體(ti) 積84L，所需時間100小時以上。後一個(ge) 瓶子*凍住（離開冰點）需要80個(ge) 小時左右。

這樣長時間緩慢冷凍，單個(ge) 瓶子蛋白濃度會(hui) 發生極大的不均勻。有數據表明在17小時的冷度，瓶子內(nei) 部的濃度變化就會(hui) 在10倍左右。如果80倍的話。濃度變化值則差別更大。

    同時，壓縮機 長時間不停歇工作，超低溫冰箱可能會(hui) 出現故障（過熱），

第三種情況，速凍箱，具有和冰箱一樣溫度範圍，降溫速度快，同時機器帶有風扇，空氣可以充分循環，這種腔體(ti) 很多帶有加溫設備，溫度均一性很好。一般在-70℃下，空載+/-3℃以內(nei) ，滿載+/-2℃

由於(yu) 速凍箱內(nei) 部有大麵積風扇，腔體(ti) 能很好空氣流通。

有數據 表明，冰箱內(nei) 放置24個(ge) 5L的瓶子，每個(ge) 瓶子放3.5L的液體(ti) 。設定溫度在-40℃，總共液體(ti) 體(ti) 積84L，所需時間10小時左右。

這個(ge) 時間長短是大多數用戶可以接受的。 大部分的科研認為(wei) 10幾個(ge) 小時完成冷凍，單抗的活性影響不大。

現在說說瓶子凍融的優(you) 缺點。

每種不同體(ti) 積大小的瓶子的時間差距明顯，這樣做工藝開發的時候隻能使用同樣體(ti) 積大小的瓶子

體(ti) 積越大，時間越長。

凍瓶子很多種情況，瓶子底部都會(hui) 突出，也就是瓶子會(hui) 變形。

瓶子的存儲(chu) 空間會(hui) 很大。

瓶子中的液體(ti) 會(hui) 出現冷凍，開裂，再冷凍的反複凍融情況。

1個(ge) 瓶子，5個(ge) 瓶子，10個(ge) 瓶子的冷凍曲線不一致。

在存取方麵：

瓶子的優(you) 點，拜訪方便。拿取方便，存儲(chu) 方便。但是占據關(guan) 鍵大。

瓶子的分裝和Drain不方便。整個(ge) 無菌過程不符合GMP要求。如果使用多孔的蓋子和管路，····分裝和排空這個(ge) 過程就能保證無菌了。但是在冷凍和存儲(chu) 又出現不安全隱患。

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